人源抗丙型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建、筛选及表达

• 作者: 单祥年 张建琼 张雪萍 林陵 王琰 谢维
• 来源期刊: 上海免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体抗体 HCV 人源单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2000,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 304-307
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 3642字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2000.05.015

摘要

用常规RT-PCR法,直接从5名丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中扩增抗体重链Fd基因和κ轻链基因,构建噬菌体抗体Fab库.对抗体库进行5轮吸附-洗脱-扩增的亲和选择后,以ELISA法鉴定抗HCV噬菌体抗体.5轮亲和选择使特异性噬菌体抗体得到高度富集,抗HCV噬菌体抗体阳性克隆达96%.对一阳性克隆在大肠杆菌中表达,经ELISA及Westernblot分析鉴定,证实成功表达出人源可溶性Fab.对抗体基因VH和VκDNA序列进行测定,证实所获基因为抗体可变区基因.抗HCV噬菌体抗体库的构建和人源抗HCV单克隆抗体Fab段的制备,为HCV感染的诊断、治疗和发病机制的研究提供有效的分子工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张建琼	南京铁道医学院微生物学与免疫学教研室	7	62	4.0	7.0
2	张雪萍	南京铁道医学院微生物学与免疫学教研室	8	77	5.0	8.0
3	林陵	南京铁道医学院微生物学与免疫学教研室	7	62	4.0	7.0
4	谢维	南京铁道医学院微生物学与免疫学教研室	8	70	4.0	8.0
5	单祥年	南京铁道医学院微生物学与免疫学教研室	14	111	6.0	10.0
6	王琰		3	21	2.0	3.0