抗人CD3改形单链抗体的构建、表达及活性测定

• 作者: 俞小淙 刘喜富 孙健 张卫国 林晴 蒋欣 陈润生 黄华梁 黄浩旻
• 来源期刊: 遗传学报
• 学科: 生物学
• 关键词: CD3 改形抗体 表达载体 构建 表达
• 年，卷（期）: 2000,（9）
• 页码范围: 762-771
• 页数: 10页
• 分类号: Q78
• 字数: 4487字
• 语种: 中文

摘要

CD3单抗通过多种途径有效地影响机体的免疫状态,在临床应用中具有极大的潜力.为克服鼠源单抗用于临床的局限性,拟采用抗体工程技术研制抗人CD3改形单链抗体.首先,将鼠源CD3单抗OKT3轻重链CDRs分别移植到人源抗体LS1轻链和Nd重链的框架中,经计算机模拟其空间构象,进行残基替换,确定CD3改形VL、VH氨基酸序列,化学合成改形VL、VH基因,将其分别插入至载体pROH80中,构建成抗人CD3改形单链抗体(scFv)基因.再将scFv基因克隆至构建的表达载体pALM中诱导表达,产物主要为包涵体.对包涵体进行变性和复性,用IMAC法纯化,FACS法测定CD3改形scFv与抗原的结合活性,显示其竞争抑制率为18%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙健	中国科学院生物物理研究所	75	457	12.0	18.0
2	俞小淙	中国科学院遗传研究所	6	29	3.0	5.0
3	蒋欣	中国科学院遗传研究所	8	43	4.0	6.0
4	林晴	中国科学院遗传研究所	11	52	4.0	6.0
5	黄华梁	中国科学院遗传研究所	16	158	7.0	12.0
6	张卫国	中国科学院遗传研究所	12	118	5.0	10.0
7	刘喜富	中国科学院遗传研究所	1	7	1.0	1.0
8	黄浩旻	中国科学院遗传研究所	1	7	1.0	1.0
9	陈润生	中国科学院生物物理研究所	33	413	10.0	20.0