人钙调素基因表达载体的构建及在大肠杆菌DH5α中的表达

• 作者: 徐建平 李晓军 武建国 郭大文
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钙调素 基因表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 61-63
• 页数: 3页
• 分类号: R392|Q78
• 字数: 2435字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人钙调素(CaM)基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达人CaM蛋白.方法:用PCR方法获得人钙调素基因Ⅲ(hCaMⅢ cDNA),将其插入表达载体pBV220,构建重组表达质粒hCaMⅢ/pBV220,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆.结果:阳性重组子在大肠杆菌DH5α中经温度诱导可高效表达CaM蛋白,经15%SDS-PAGE分析,可观察到一分子量与理论值相符(约17 kD)的诱导表达条带,其表达量占菌体蛋白总量的20%.进一步分析表达产物的性质表明,CaM主要以可溶性形式表达.Western blot结果证实,17 kD的表达条带可与标准鼠抗CaM McAb起特异反应.结论:用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达人CaM,为进一步研究CaM的生物学功能及研制抗CaM单克隆抗体奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓军	南京军区南京总医院全军医学检验中心免疫室	109	618	13.0	19.0
2	武建国	南京军区南京总医院全军医学检验中心免疫室	139	1275	16.0	31.0
3	徐建平	南京军区南京总医院全军医学检验中心免疫室	24	282	10.0	16.0
4	郭大文	南京军区南京总医院全军医学检验中心免疫室	2	10	1.0	2.0