胶原沉积抑制因子cDNA的分子克隆及其在大肠杆菌DH5α的表达

• 作者: 何晓霞 朱任之 杨国嵘 薛永杰 贺雪姣 郁荣
• 来源期刊: 西北国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胶原沉积抑制因子 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 321-324
• 页数: 4页
• 分类号: R373.4
• 字数: 2837字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-8622.2005.05.001

摘要

目的:获取胶原沉积抑制因子(Decorin)互补脱氧核糖核酸(cDNA)并在大肠杆菌DH5α中表达出成熟蛋白.方法:用巢式逆转录聚合酶链反应(nest-RT-PCR)法从体外培养的成纤维细胞(2BS)中获取Decorin cDNA,克隆入pMD18-T载体.测序后,将成熟蛋白区亚克隆入pGEX-4T-1中,用PCR法、限制性酶切和测序对融合克隆进行鉴定.经过鉴定的融合克隆在大肠杆菌DH5α中进行表达.结果:获取的1 181 bp 的Decorin cDNA片段与基因bank中收录的序列相似性达99.75%;可从GST-Decorin成熟蛋白cDNA融合克隆中扩增出和酶切出1 005 bp的目的片段;融合克隆有完整的开放阅读框架;融合蛋白在大肠杆菌DH5α中成功表达.结论:获取了Decorin cDNA并在大肠杆菌DH5α中表达出GST-Decorin成熟蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨国嵘	解放军第一医院病理科	39	98	5.0	7.0
2	薛永杰	解放军第一医院病理科	23	54	3.0	6.0
3	贺雪姣	解放军第一医院病理科	10	13	2.0	2.0
4	郁荣	解放军第一医院病理科	12	19	3.0	3.0
5	朱任之	兰州大学病理学研究所	13	48	4.0	6.0
6	何晓霞	甘肃省人民医院神经外科	5	10	2.0	3.0