含RGD序列水蛭素嵌合抗栓剂的构建与表达

• 作者: 周雪 朱圣庚 黄仪秀
• 来源期刊: 北京大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 水蛭素 RGD序列 嵌合抗栓剂
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 页码范围: 490-495
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 2986字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0479-8023.2001.04.008

摘要

通过对水蛭素及一些含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列的多肽类血小板聚集抑制剂结构与功能的分析,设计并构建了两个在水蛭素C端融合RGD序列的嵌合分子.嵌合体基因分别重组到表达载体pET-21a(+)中并转化大肠杆菌BL21(DE3).经限制酶消化和DNA序列分析,证明两种重组质粒与设计完全一致.由于RGD-水蛭素嵌合基因上游连接了金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)的信号肽序列,在IPTG诱导下两种嵌合分子都获得了分泌表达,表达产物主要集中在细胞周质空间.通过离子交换层析和凝胶过滤层析分别对两种嵌合体蛋白进行纯化,纯化产物在Tricine-SDS-PAGE中都显示为单一条带.活性分析结果表明两种嵌合体蛋白在保留水蛭素抗凝血酶活力的同时,还呈现抗血小板聚集活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱圣庚	北京大学生命科学学院	24	234	6.0	14.0
2	周雪	北京大学生命科学学院	2	8	2.0	2.0
3	黄仪秀	北京大学生命科学学院	9	98	4.0	9.0