日本血吸虫14-3-3蛋白质编码基因在原核细胞中的表达

• 作者: 汪学龙 沈继龙 蒋作君
• 来源期刊: 安徽医学
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 14-3-3蛋白质 基因克隆
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 5-7
• 页数: 3页
• 分类号: R383.24
• 字数: 1897字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-0399.2001.02.005

摘要

目的:为了寻找日本血吸虫病新的诊断和候选疫苗分子,克隆日本血吸虫14-3-3蛋白质编码基因,并进行表达.方法:提取日本血吸虫成虫RNA,设计合成引物,用RT-PCR法扩增出日本血吸虫14-3-3抗原(Sj14-3-3)基因编码序列,将其克隆入pGEM-T载体,然后在真核表达载体pBKCMV中亚克隆,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE观察表达结果.结果:RT-PCR法扩增出一条大小约765 bp的特异性片断,克隆质粒pGEM-Sj14-3-3和真核表达质粒pBKCMV经双酶切和以重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段,诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约32.5 kDa大小的融合蛋白条带.结论:本实验成功地克隆了日本血吸虫14-3-3抗原的编码基因,并在原核细胞中进行表达,为进一步的免疫诊断和核酸疫苗研究奠定了基础.