胸腺素α1-硫氧还蛋白融合蛋白基因的表达及其生物学功能的初步研究

• 作者: 张英起 王俊楼 石继红 赵宁 赵永同 韩苇 颜真
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 胸腺素α1 硫氧还蛋白 基因克隆 融合表达 蛋白质纯化 生物活性 细菌
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 67-71
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.6
• 字数: 2858字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2001.02.002

摘要

胸腺素α1（thymosin alpha 1, Tα1）作为一种免疫增强剂，临床用途广泛。为了大量制备Tα1，按大肠杆菌惯用密码子用人工方法合成Tα1基因，克隆于pUC19的EcoRI和PstI位点，经测序证明序列正确后，串联为4串体(Tα1④)，经再次测序确认后克隆入pThioHisA的EcoRI和PstI位点，转化大肠杆菌TOP10菌种，酶切鉴定证明正确后，经1mmol/L IPTG诱导4h，获得硫氧还蛋白与Tα1④的融合表达，并经Western blot分析证实。用离子交换柱层析可纯化出硫氧还蛋白与Tα1④的融合蛋白，利用3H-TdR掺入法证实，该融合蛋白具有刺激小鼠脾淋巴细胞的活性。