人IL-17F融合蛋白在E.coli中表达及其生物学活性研究

• 作者: 杨吉成 盛伟华 缪竞诚 谢宇锋
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素17F GST-融合蛋白 生长抑制 血管形成
• 年，卷（期）: 2006,（12）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 1086-1091
• 页数: 6页
• 分类号: R392.13
• 字数: 4991字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建重组原核表达载体pGEX-5X-3/hIL-17F,使其在大肠杆菌中表达,获得GST-hIL-17F融合蛋白,并研究其生物学活性.方法:利用PCR法从自行构建的含hIL-17F基因的pUCm-T/hIL-17F载体中扩增其成熟肽基因序列,亚克隆于pGEX-5X-3中,构建原核表达载体pGEX-5X-3/hIL-17F,并在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达包涵体融合蛋白, 经纯化后进行Western blot鉴定.MTT法分析GST-hIL-17F纯品蛋白对人脐静脉内皮细胞ECV304的生长抑制作用,ELISA法检测对ECV304内皮细胞表达IL-6、IFN-γ和TNF-α的生物学作用,并采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)法分析其对血管形成的影响.结果:GST-hIL-17F融合蛋白在大肠杆菌BL21中获得了高效表达,约占菌体总蛋白的55%,能产生约41 kD的融合蛋白,且Western blot证实确为GST-hIL-17F目的蛋白.GST-hIL-17F具有明显抑制ECV304内皮细胞增殖和上调表达IL-6的生物学效应,并具有显著的抗血管形成活性.结论:hIL-17F重组原核表达和血管形成抑制效应的初步研究已获成功,为进一步研究rhIL-17F的抗血管形成机制和临床应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪竞诚	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	95	511	13.0	17.0
2	杨吉成	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	164	943	16.0	20.0
3	盛伟华	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	129	700	15.0	18.0
4	谢宇锋	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	51	324	11.0	15.0