反义VEGF165腺病毒重组体的构建及鉴定

• 作者: 张群林 李瑞明 王俊峰 王卫民 王家宁 黄永章
• 来源期刊: 郧阳医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 内皮生长因子 腺病毒 RNA,反义 基因扩增
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q784
• 字数: 3275字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-9674.2001.01.001

摘要

目的：构建含人反义血管内皮生长因子165(VEGF165)基因的重组腺病毒载体，为采用反义VEGF165RNA防治肿瘤的研究奠定基础。方法：将人VEGF165 cDNA反向插入到穿梭质粒pHCMVSP1A的CMV启动子之下，即pAd-ahVEGF165。后者与pJM17通过脂质体共转染293细胞，经同源重组获得含人反义VEGF165基因的重组腺病毒Ad-ahVEGF165。通过PCR共扩增法鉴别Ad-ahVEGF165的正确与否。根据260nm的紫外光吸收值计算病毒滴度。结果：VEGF165 cDNA成功地反向插入了pHCMVSP1A载体，以重组病毒基因组DNA为模板，同时扩增出了576bp的反义VEGF165基因片段和860bp的腺病毒骨架基因片段，证实了Ad-ahVEGF165的正确性。病毒滴度为5.6×1011 pfu/ml。结论：成功构建了携带人反义VEGF165基因的腺病毒Ad-ahVEGF165，本研究为采用反义VEGFRNA途径治疗肿瘤的在体、离体实验奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王俊峰	郧阳医学院附属太和医院生命科学研究所	24	79	5.0	7.0
2	王家宁	郧阳医学院附属太和医院生命科学研究所	119	709	13.0	20.0
3	黄永章	郧阳医学院附属太和医院生命科学研究所	66	379	11.0	16.0
4	王卫民	郧阳医学院附属太和医院生命科学研究所	35	136	7.0	10.0
5	张群林	郧阳医学院附属太和医院生命科学研究所	37	129	6.0	9.0
6	李瑞明	郧阳医学院附属太和医院生命科学研究所	13	48	4.0	6.0