柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建

• 作者: 赵其平 韩红玉 黄兵
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 柔嫩艾美耳球虫 孢子化卵囊 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 669-672
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 3712字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2001.06.016

摘要

用建立表达性文库的方法,构建了Eimeriatenella孢子化卵囊噬菌体ZAP表达性cDNA文库.首先用TRlzol试剂盒从E.tenella孢子化卵囊中提取总RNA,再用Oligo(dT)12-纤维素柱从总RNA中分离mRNA,以mRNA为模板,Oligo(dT)18Linker-Primer为引物,反转录合成cDNA第一链,再在DNA聚合酶Ⅰ作用下置换合成第二链cDNA.cDNA第二链合成后用Pfu DNA聚合酶补平Xho Ⅰ位点,再与EcoR Ⅰ Adapters连接,经Xho Ⅰ酶切后,凝胶电泳回收500bp～4.0kp之间的cDNA片段,纯化后的双链cDNA与载体ZAP Express vector连接.体外包装后得到E.tenella孢子化卵囊的cDNA表达性文库,经测定该文库的容量为6×106,扩增后文库的滴度为1×1011Pfu/mL,经PCR测定,该文库的重组率为96%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵其平	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	29	282	10.0	16.0
2	黄兵	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	43	485	12.0	20.0
3	韩红玉	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	17	147	6.0	12.0