蛋白激酶Cα-EGFP及其突变体真核表达载体的构建和在C2C12细胞中的表达

• 作者: 张耕 贾弘禔 陆纲 陈瑞华 鹿培源
• 来源期刊: 张家口医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白激酶C PKCα突变体 表达 转位 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-7
• 页数: 3页
• 分类号: R-331
• 字数: 2593字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1396.2001.02.003

摘要

目的:研究PKCα结构与转位的关系.方法:用PCR的方法构建了4个PKCα突变体,在DNA连接酶的作用下与pEGFP-N1结合后转移至质粒中,构建PKCα突变体-EGFP真核表达载体.观察它们在C2C12细胞中的表达及转位情况.结果:pPKCα-EGFP-N1转染C2C12肌细胞24h后,细胞内表达的PKCα-GFP融合蛋白主要定位于细胞浆,细胞核中未见分布.pPKCα-βI-EGFP-N1、pPKCβI-α-EGFP转染C2C12细胞24h的表达产物集中在胞浆.pPKCα(-)-EGFP-N1、pPKCα(m)-EGFP-N1转染C2C12细胞24h的定位与野生型明显不同.结论:PKCα的调节区(C1V1C2)尤其是RACK结合区(C2)、PKCα的催化区(C3V4C4)尤其是ATP结合位点与PKCα的转位密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鹿培源	北京大学医学部生物化学与分子生物学系	9	35	3.0	5.0
2	贾弘禔	北京大学医学部生物化学与分子生物学系	24	171	6.0	12.0
3	陆纲	北京大学医学部生物化学与分子生物学系	7	17	2.0	4.0
4	陈瑞华	张家口医学院生物教研室	6	15	2.0	3.0
5	张耕	张家口医学院组胚教研室	4	5	2.0	2.0