A群猪轮状病毒G5型OSU株VP7基因的克隆及其重组杆状病毒的鉴定

• 作者: 师东方 徐宏军 李一经 王君伟 贾永清
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 猪轮状病毒 VP7基因 克隆 重组杆状病毒
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 18-20
• 页数: 3页
• 分类号: S852.659.4
• 字数: 3329字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2002.06.005

摘要

利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出A群猪轮状病毒(PRV)G5型OSU株长度约为1.0kb的基因片段,将其克隆到pMD 18-T载体上进行测序鉴定,证明为该PRV的VP7蛋白基因,与已发表的该PRV VP7基因序列的同源性为99.8%.将该基因黏端克隆至表达载体PblueBAChisC质粒中,酶切及PCR鉴定表明获得了PRV-VP7蛋白基因与PblueBAChisC质粒的阳性重组子.纯化该重组质粒并与线性杆状病毒DNA分子Bac-N-Blue共转染昆虫细胞sf9,5 d后收获重组病毒.通过对重组杆状病毒DNA分子的酶切及PCR鉴定,确定PRV-VP7基因已正确插入.将经3次蚀斑筛选纯化后的该重组杆状病毒接种于sf9细胞大量增殖后,获得了重组杆状病毒PRV-VP7蛋白的真核表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王君伟	东北农业大学动物医学院	214	1491	20.0	26.0
2	李一经	东北农业大学动物医学院	219	1679	20.0	27.0
3	师东方	东北农业大学动物医学院	56	299	9.0	14.0
4	贾永清	东北农业大学动物医学院	21	198	9.0	13.0
5	徐宏军	东北农业大学动物医学院	3	20	3.0	3.0