大鼠IL-6受体基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 张萍 李改丽 段晓莉 王百忍 费玲玲 鞠躬
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IL-6受体 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 417-420
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3453字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2002.05.001

摘要

目的获取大鼠IL-6受体(IL-6R)的基因并高效表达.方法用PCR技术, 从正常成年大鼠脑的cDNA文库中, 获得编码IL-6R基因的序列.测序后, 通过PCR扩增和基因重组, 分别构建IL-6R基因全长和羧基端部分编码序列的表达载体, 并导入大肠杆菌DH5α中, 通过IPTG诱导表达重组融合蛋白.对表达的羧基端序列编码的融合蛋白过谷胱甘肽琼脂糖柱进行纯化. 结果获得正常成年大鼠IL-6R(98～1 493位)的基因, 测序结果与已发表的基因序列相一致.重组蛋白以包涵体的形式进行表达.经SDS-PAGE分析, 在相对分子质量(Mr)为74 000和43 000处, 各有1条特异的蛋白带.对羧基端基因表达的包涵体形式的蛋白进行变性、重折叠及纯化后, 得到了高纯度融合蛋白.结论成功地克隆正常成年大鼠IL-6R基因, 并在E. Coli DH5α中高效表达, 为进一步制备抗IL-6R抗体和进行原位分子杂交研究创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王百忍	第四军医大学神经科学研究所	83	453	12.0	16.0
2	鞠躬	第四军医大学神经科学研究所	188	1218	17.0	24.0
3	张萍	第四军医大学神经科学研究所	46	249	8.0	13.0
4	李改丽	第四军医大学神经科学研究所	11	58	4.0	7.0
5	费玲玲	第四军医大学神经科学研究所	7	24	3.0	4.0
6	段晓莉	第四军医大学神经科学研究所	16	102	5.0	9.0