嗜水气单胞菌外膜蛋白omp TS基因的高效表达及其免疫原性

• 作者: 朱静仪 谢俊锋
• 来源期刊: 中山大学研究生学刊：自然科学与医学版
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 外膜蛋白 ompTS基因 基因表达 免疫原性 核苷酸序列 败血症
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 页码范围: 81-87
• 页数: 7页
• 分类号: S852.61

摘要

根据嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS的核苷酸序列设计引物，运用聚合酶链式反应(PCR)扩增出与预期大小相符的基因片段。将此基因片段克隆至质粒pRSET A的BamH I和EcoR I位点，构建重组质粒，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTC诱导获得高效表达，SDS—PAGE蛋白电泳表明在39．9kD处出现超强特异带，占总蛋白的51％。以Ni-NTA-Conjugate抗体进行Western blot分析证明该39．9kD的蛋白为所表达的融合蛋白。纯化融合蛋白注射雄性新西兰大白兔可诱导产生特异抗体。ELISA和Western blot检测结果显示，该抗体与表达的融合蛋白和嗜水气单胞菌中提取的36．9kD外膜蛋白均呈阳性反应，表明所表达的融合蛋白仍保持原有外膜蛋白的免疫原性，从而为此融合蛋白作为疫苗的候选成份提供理论依据。