嗜水气单胞菌溶血素A表达、免疫原性及活性检测

• 作者: 丁铲 赵秀敏 陈鸿军 韩先干 高勤学
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜水气单胞茵 溶血素 克隆 表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 细菌
• 页码范围: 45-50
• 分类号: S852.612|Q785
• 字数: 4122字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2011.01.008

摘要

根据已发表的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)溶血素A基因序列设计一对特异性引物,以TPS30茵株基因组为模板,通过PCR扩增溶血素A基因,经T-A克隆、序列测定和分析,结果表明,该基因包含1482 bp碱基,编码494个氨基酸.将溶血素A定向克隆至表达载体pET32a(+)中,构建重组表达质粒pETTHA,在IPTG诱导下成功获得重组表达蛋白His-GroEL,大小为68 kDa.对该质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达特性分析表明,最佳的诱导表达条件为:在0.1 mmol/L的IPTG浓度下,21℃诱导表达3 h.表达的溶血素A蛋白纯化后免疫小鼠,经Western blot检测,表明该蛋白具有免疫原性.对纯化的溶血素A蛋白复性后,进行溶血实验,结果表明该蛋白具有溶血活性.通过本实验的研究,为进一步研究嗜水气单胞茵溶血素的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩先干	中国农业科学院上海兽医研究所	31	220	9.0	14.0
2	丁铲	中国农业科学院上海兽医研究所	95	454	11.0	16.0
3	陈鸿军	中国农业科学院上海兽医研究所	57	114	6.0	8.0
4	高勤学		19	43	4.0	5.0
5	赵秀敏		13	22	3.0	4.0