重组膜联蛋白Ⅱ表达载体构建及其促纤溶特性研究

• 作者: 乔振华 周华蓉 宋善俊 张晓晖 杨林花 沈关心 胡豫 魏文宁
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 膜联蛋白Ⅱ 质粒构建 基因表达 出血 纤维蛋白溶解
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 441-446
• 页数: 6页
• 分类号: R554|R733.7|Q78
• 字数: 4230字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2002.05.015

摘要

膜联蛋白Ⅱ(annexinⅡ)是纤溶酶原和组织型纤溶原激活物的共同受体.本研究旨在探讨annexinⅡ引起急性白血病及其它肿瘤患者原发性纤溶亢进的分子病理机制,阐明annexinⅡ促纤溶活性,为探讨annexinⅡ在凝血障碍中的作用提供理想的载体模型.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增annexinⅡ基因片段,经纯化及连接,用脂质体转染入HL-60细胞中表达;用多光子激发的共聚焦显微镜观察其表达产物的胞内分布及结构特性;用流式细胞术及Western印迹对转染的细胞表达进行定量及定性分析,并揭示其对纤溶酶活性的影响.结果显示:成功地构建了pZeoSV2(+)/ANNⅡ真核表达质粒,经转染HL-60细胞后,可表达annexinⅡ活性蛋白,荧光检测显示其表达蛋白分布在转染细胞的膜表面;FCM检测annexinⅡ在转染后48小时呈高表达;annexinⅡ可显著增加纤溶酶的活性,且瞬时表达及稳定表达具有相同的结果.annexinⅡ反义寡核苷酸与单抗均可显著抑制annexinⅡ的促纤溶活性(P＜0.01).结论:annexinⅡ在纤维蛋白溶解中具有重要作用,用本研究构建的annexinⅡ重组载体可为今后的相关研究提供实验基础,并为防治出血及血栓性疾病研究有可能提供新的思路和开辟新的途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈关心	华中科技大学同济医学院免疫研究所	114	554	12.0	18.0
2	杨林花	山西医科大学第二医院血液科	222	741	13.0	16.0
3	魏文宁	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科	77	438	13.0	15.0
4	胡豫	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科	154	742	14.0	21.0
5	乔振华	山西医科大学第二医院血液科	141	402	10.0	14.0
6	张晓晖	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科	13	68	5.0	7.0
7	周华蓉	华中科技大学同济医学院免疫研究所	4	10	2.0	3.0