重组纤溶酶原Kringle 5区基因杆状病毒载体的构建及表达研究

• 作者: 于金德 尤蓓 尹桂芝 张一帆 李彪 赵龙 陆林
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 纤溶酶原K5 骨骼肌细胞 杆状病毒载体
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q782|Q786
• 字数: 3311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2004.01.003

摘要

目的克隆人源性纤溶酶原Kringle5(K5)基因,构建K5分泌型杆状病毒载体,并检测其在肌细胞中的表达.方法引物中加入前胰岛素原信号肽基因序列,PCR产物经AgeⅠ和AccⅠ双酶切后装入pFB载体中构建为pFBK5,将其转染肌细胞C2C12,经Western 印迹检测重组蛋白的表达并用MTT试验进行初步活性鉴定.结果成功扩增出了K5基因序列,测序正确,转染了pFBK5的C2C12细胞及上清中均检测到了特异性的14 ku蛋白条带且其对ECV304细胞产生剂量依赖性抑制作用,而转染空载体对照组无相应蛋白表达.结论人源性纤溶酶原K5分泌型杆状病毒载体构建成功,表达的重组蛋白具有生物活性,为进一步的病毒制备奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尤蓓	上海第二医科大学瑞金医院心脏内科	12	68	4.0	8.0
2	于金德	上海第二医科大学瑞金医院心脏内科	37	246	8.0	14.0
3	陆林	上海第二医科大学瑞金医院心脏内科	14	100	6.0	9.0
4	李彪	上海第二医科大学瑞金医院核医学科	40	129	6.0	9.0
5	尹桂芝	上海第二医科大学瑞金医院心脏内科	6	20	3.0	4.0
6	张一帆	上海第二医科大学瑞金医院核医学科	12	55	5.0	7.0
7	赵龙	上海第二医科大学瑞金医院核医学科	6	27	3.0	5.0