表达HIV-1 gag-gp120嵌合基因酵母工程菌的构建及表达条件的优化

• 作者: 李子健 江文正 金宁一 韩文瑜
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1 gag-gp120 毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 482-484
• 页数: 3页
• 分类号: R37
• 字数: 2612字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2002.05.003

摘要

目的构建表达HIV-1 gag-gp120嵌合基因的酵母工程菌,并优化表达条件. 方法将gag-gp120嵌合基因插入到酵母表达载体pHILS1中,构建了表达质粒pHILGP.线性化质粒电转化毕赤酵母菌GS115后进行整合,通过PCR及表达产物的SDS-PAGE和ELISA等方法筛选阳性酵母工程菌,并优化表达条件. 结果成功构建表达融合蛋白的酵母工程菌,表达量为13%左右.表达蛋白能与HIV-1阳性血清发生反应,但其相对分子质量(Mr)比预计计算的值要小.最佳表达条件为:BMMY培养基,85%溶解氧,培养时间3*!d,1%甲醇诱导浓度. 结论表达的融合蛋白具有很好的抗原特异性,存在于上清中,这有利于目的蛋白的分离纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩文瑜	解放军军需大学基因工程重点实验室	34	831	14.0	28.0
2	金宁一	解放军军需大学基因工程重点实验室	138	903	16.0	21.0
3	江文正	解放军军需大学基因工程重点实验室	37	381	9.0	18.0
4	李子健		18	79	5.0	7.0