非天然D-型氨基酸生物转化中酶的纯化及其基因序列

• 作者: 封霞 袁静明 赵莉霞
• 来源期刊: 山西大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 菌株No.2262 海因酶 N-氨甲酰基-D-氨基酸酰氨水解酶 纯化 基因序列
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 页码范围: 156-162
• 页数: 7页
• 分类号: Q814
• 字数: 3933字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-2395.2002.02.016

摘要

D-海因酶(D-Hydantoinase,HDTase)和N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶(D-Carbamoylase,DCase)是医药和食品工业上用于生物转化D-型氨基酸的酶.为了用人工酶替代现用的天然酶转化工艺,我们用热变性、硫酸铵分级及Q-Sepharose、Phenyl-Sepharose、Superose12等多步柱层析,从现用菌株No.2262中纯化了HDTase和DCase,二酶均达到SDS-PAGE纯,经N-端序列分析,HDTase和DCase的N-末端氨基酸序列分别为:MDKLIKNGTI和MTRQKILAF.首先,根据酶的N-末端氨基酸顺序推论并合成了正向多核苷酸简并引物,然后按蛋白质数据库资料,在比较不同菌株氨基酸残基同源性基础上,化学合成了数对反向多核苷酸引物,以菌株No.2262基因组DNA为模板,经PCR扩增获得了HDTase的部分基因序列(～700bp)和DCase的全部基因序列(912bp),为使人工酶用于非天然D-型氨基酸的生物转化奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁静明	山西大学生物工程研究中心	34	203	8.0	12.0
2	封霞	山西大学生物工程研究中心	3	33	3.0	3.0
3	赵莉霞	山西大学生物工程研究中心	4	34	3.0	4.0