地衣芽孢杆菌2709和 6816碱性蛋白酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及序列分析

• 作者: 唐雪明 方惠英 沈微 王正祥 诸葛健 邵蔚蓝
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 地衣芽孢杆菌 碱性蛋白酶 基因的克隆和表达 序列分析 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 页码范围: 209-214
• 页数: 6页
• 分类号: Q78:Q939.1
• 字数: 4923字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1006-687X.2002.02.019

摘要

用PCR方法从地衣芽孢杆菌2709和6816中扩增了碱性蛋白酶基因(apr1和 apr2),扩增的DNA片段插入到大肠杆菌载体pET-28a中,构建成重组分泌型表达载体pAPR1、 pAPR2.pAPR1、 pAPR2中碱性蛋白酶基因在大肠杆菌宿主JM109(DE3)中得到表达.SDS-PAGE分析显示融合表达产物的分子量均为30.5×103,同核酸序列测定所推导的值相符.表达产物分别占细胞总蛋白的8.0%和7.5%.2709重组菌所得酶活为1 210 u/mL,6816重组菌所得酶活为1 175 u/mL.研究发现,重组的碱性蛋白酶在进入大肠杆菌周质空间时可能存在前肽自动脱落的现象.同时,对地衣芽孢杆菌2709碱性蛋白酶基因序列进行了测定和比较分析,发现与地衣芽孢杆菌6816碱性蛋白酶基因的同源性为98%. 图5 参11

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	诸葛健	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	150	1920	23.0	36.0
2	沈微	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	98	817	14.0	24.0
3	唐雪明	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	21	261	10.0	15.0
4	王正祥	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	120	1443	20.0	31.0
5	邵蔚蓝	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	54	772	16.0	25.0
6	方惠英	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	13	152	7.0	12.0