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摘要:
目的构建编码人Ⅱ型胶原蛋白250~270多肽片段(HuC Ⅱ 250~270)的多聚基因,以获得高效表达、高度可溶和便于纯化的重组多肽基因.方法选用大肠杆菌(E.coli)偏爱密码子优化HuC Ⅱ 250~270的基因组成.通过化学合成和PCR法,获得HuC Ⅱ 250~270的基因,并利用Bam HI和BglⅡ同裂酶进行酶切位点串联获得6聚体.对影响重组HuC Ⅱ 250~270表达的各种因素进行系统研究,以获得优化表达的条件.对表达产物进行分离纯化.结果酶切分析和DNA测序证实,6聚目的基因的构建正确.融合表达的量明显高于非融合表达,在优化条件下,可达30%.表达产物的可溶性明显提高(在90%以上),其相对分子质量(Mr)与预期的相符,纯化后的纯度达90%以上.结论实现了HuC Ⅱ 250~270的高效表达,为研究类风湿性关节炎的发病机制和治疗提供了实验依据.为在原核细胞中高效表达的胶原蛋白的功能性小片段,提供了可供参考的借鉴.
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文献信息
篇名 重组人Ⅱ型胶原蛋白免疫原性多肽表达的研究
来源期刊 细胞与分子免疫学杂志 学科 医学
关键词 Ⅱ型胶原蛋白 表达 类风湿性关节炎 多肽
年,卷(期) 2002,(4) 所属期刊栏目 临床研究
研究方向 页码范围 383-386
页数 4页 分类号 R392.11
字数 3346字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1007-8738.2002.04.023
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王彦宏 第四军医大学西京医院临床免疫科 41 299 11.0 15.0
2 朱平 第四军医大学西京医院临床免疫科 74 630 14.0 20.0
3 陈常庆 中国科学院上海生物工程研究中心 36 310 8.0 17.0
4 赵旭东 中国科学院上海生物工程研究中心 27 121 6.0 9.0
5 王宏坤 第四军医大学西京医院临床免疫科 8 34 4.0 5.0
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研究主题发展历程
节点文献
Ⅱ型胶原蛋白
表达
类风湿性关节炎
多肽
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
细胞与分子免疫学杂志
月刊
1007-8738
61-1304/R
大16开
西安市长乐西路169号
52-184
1985
chi
出版文献量(篇)
7013
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22
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