超抗原SED在大肠杆菌中的表达

• 作者: 朱锡华 李亚斐 杨劲 黄云辉
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 超抗原 葡萄球菌D型肠毒素 原核表达
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 92-94
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 1848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2002.02.004

摘要

目的构建稳定的SED原核表达系统.方法采用PC R技术扩增葡萄球菌D型肠毒素(SED)超抗原的成熟蛋白编码区DNA序列,构建SED DNA与6个组氨酸基因融合的表达载体pTrcHis-SED,转入E.coli DH5α,IPTG诱导后,用SDS-PAGE和免疫印迹检测融合蛋白的表达情况.目的蛋白用Ni-NTA金属亲和层析法进行纯化,SDS-PAGE和毛细管电泳检测蛋白纯度.结果成功构建了原核表达载体pTrcHis-SED.分子量约为28 000 u的6His-SED融合蛋白可在E.coli DH5α中稳定表达.Ni-NTA金属亲和层析后得到纯度较高(>95%)的SED融合蛋白,且具有免疫学活性.结论本研究为SE D免疫识别研究奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱锡华	第三军医大学免疫学研究所	50	252	7.0	13.0
2	杨劲	第三军医大学免疫学研究所	45	153	7.0	8.0
3	黄云辉	第三军医大学免疫学研究所	23	73	5.0	6.0
4	李亚斐	第三军医大学免疫学研究所	51	289	9.0	14.0