细菌-酵母穿梭表达质粒pGBKT7-MIF的构建及转化

• 作者: 余细勇 单志新 林曙光 林秋雄 符永恒 谭虹虹
• 来源期刊: 中山医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 巨噬细胞游走抑制因子 质粒pGBKT7 克隆,分子
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 333-335
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2260字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2002.05.005

摘要

[目的]构建并转化能在酵母菌AH109中表达巨噬细胞游走抑制因子(MIF)的穿梭表达质粒pGBKT7-MIF.[方法]用RT-PCR方法从人T淋巴细胞中扩增MIF基因全外显子片段,并定向克隆入细菌-酵母穿梭表达质粒pGBKT7中;用PEG/LiAC法将pGBKT7-MIF转化感受态酵母菌AH109.提取转化酵母菌的质粒DNA,转化大肠杆菌并行质粒的酶切鉴定.[结果]扩增出人MIF cDNA片段,限制性内切酶酶切和DNA测序证实获得正确的重组质粒pGBKT7-MIF;获得可在色氨酸缺陷培养基(SD/-trp)上生长含pGBKT7-MIF的酵母菌克隆.酶切鉴定表明pGBKT7-MIF已转化入酵母菌AH109.[结论]成功构建穿梭质粒pGBKT7-MIF,并转化入酵母菌AH109.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余细勇	广东省心血管病研究所分子药理室	51	389	9.0	18.0
2	林曙光	广东省心血管病研究所分子药理室	33	141	8.0	10.0
3	符永恒	广东省心血管病研究所分子药理室	13	71	4.0	8.0
4	林秋雄	广东省心血管病研究所分子药理室	13	34	5.0	5.0
5	单志新	广东省心血管病研究所分子药理室	12	31	3.0	5.0
6	谭虹虹	广东省心血管病研究所分子药理室	4	14	2.0	3.0