酵母双杂交表达载体pGBKT7_NPR1与pGADT7_NPR1的构建及酵母菌的转化

• 作者: 何乐 刘春林 徐健 肖牧 阮颖
• 来源期刊: 作物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: NPR1 基因克隆 酵母双杂交载体 酵母转化
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 213-216
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3150字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5280.2013.03.01

摘要

NPR1是水杨酸介导的系统获得性抗性(SAR)途径中不可或缺的一个转录辅助因子.在SA诱导下,NPR1被转运至细胞核内并与一些转录因子结合,以启动下游基因的表达.本研究通过PCR扩增获得拟南芥中NPR1基因CDS序列,经过限制性内切酶酶切后在T4连接酶作用下分别克隆至pGBKT7与pGADT7酵母表达载体上,并成功将其转化至Gold酵母菌株中.为利用酵母双杂交筛选NPR1参与形成的转录复合体中其它可能存在的蛋白质并阐明其在植物防御信号传导途径中的互作模式奠定了基础.