酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-UL49的构建、表达与鉴定

• 作者: 何智强 周天鸿 朱峰 李实骞 李弘剑 李月琴 邹奕
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 酵母双杂交 人巨细胞病毒 UL49 质粒构建 诱饵蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（22）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3374-3377
• 页数: 4页
• 分类号: Q733
• 字数: 3118字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人巨细胞病毒UL49基因的诱饵表达载体,以利于筛选与pUL49相互作用的蛋白.方法 PCK扩增UL49全序列,克隆入pGBKT7,将构建好的pGBKT7-UL49转化到酵母细胞AH109;用蛋白印迹法分析诱饵蛋白的表达,检测诱饵蛋白有无毒性和自激活效应.结果 克隆成功pGBKT7-UL49;pGBKT7-UL49成功转化到AH109.转化细胞AH109[pGBKT7-UL49]表达诱饵蛋白pUL49,pUL49对转化细胞无细胞毒性、无自激活.结论 成功构建了酵母诱饵表达栽体pGBKT7-UL49,为进一步筛选与pUL49相互作用的蛋白提供了实验基础.