杜氏利什曼原虫激活蛋白激酶C受体的基因克隆化与序列分析

• 作者: 刘妍 夏小兵 成军 杨继珍 王刚 王琳 钟彦伟
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 利什曼原虫 激活蛋白激酶C受体 基因疫苗 T细胞抗原 基因克隆化
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 24-27
• 页数: 4页
• 分类号: R382.2+2
• 字数: 3168字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2002.02.006

摘要

目的克隆杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani Ld)1S株激活蛋白激酶C受体(RACK,receptor of activated protein C kinase)的编码基因,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗的研究奠定基础.方法体外培养杜氏利什曼原虫1S株无鞭毛体,常规方法提取制备基因组DNA.以硕大利什曼原虫(Leishmania amjor)的RACK基因的核苷酸序列为参照,设计并合成利什曼原虫RACK基因序列特异性的引物.以杜氏利什曼原虫的基因组DNA为模板,利用多聚酶链反应(PCR)技术,扩增获得了杜氏利什曼原虫RACK的全长编码基因.结果基因序列测定结果表明,杜氏利什曼原虫1S株RACK基因序列长度为981bp,开放读码框架由831bp组成,编码产物为276个氨基酸残基.获得的杜氏利什曼原虫1S株的RACK基因与来源于硕大利什曼原虫的RACK基因序列同源性达98%(264/267).结论本研究克隆了杜氏利什曼原虫的RACK基因,为应用诱导T细胞免疫应答抗原的编码基因进行杜氏利什曼原虫的基因疫苗研究奠定了基础.