原核表达的重组人B7.2 IgV区分子在体外实验中具有刺激活性

• 作者: 司履生 来宝长 王一理 耿宜萍 郑瑾 闫晓彩 马军
• 来源期刊: 中华医学杂志(英文版)
• 学科: 医学
• 关键词: 人B7.2/CD86 免疫球蛋白结构域 共刺激 T淋巴细胞活化 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2002,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1053-1057
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 语种: 英文
• DOI: 10.3760/j.issn:0366-6999.2002.07.022

摘要

目的研究人B7.2分子中IgV和IgC 结构域何者含有与受体结合的位点；对由原核系统表达的B7.2蛋白体外共刺激活性作出评价。 方法　用PCR方法扩增人B7.2分子胞外区的三个片段，即IgV、IgC和包括IgV和IgC在内的Ig（V+C）区段，将三片段克隆入pGEM-Teasy。继而将三片段克隆入原核表达载体pGEX-4T-3，得到pGEX-4T-3-hB7.2 IgV、pGEX-4T-3-hB7.2 IgC和pGEX-4T-3-hB7.2 Ig(V+C)三个重组体，将三重组体转化宿主菌DH5α。经SDS-PAGE和Western blot证实与GST融合存在的相应靶蛋白的表达。用抗CD3单抗模拟T细胞活化的第一信号，用［3H］-TdR掺入法观察加入目的蛋白作为第二信号可否对T细胞活化起协同效应。结果　工程菌可表达出人B7.2分子的三种融合蛋白：GST-hB7.2 IgV、GST-hB7.2 IgC和GST-hB7.2 Ig(V+C)， 且以包涵体形式存在。在第一信号存在条件下，GST-hB7.2 Ig(V+C)和GST-hB7.2 IgV均能协同第一信号活化T淋巴细胞，但GST-hB7.2 IgC无此功能。 结论　细菌可表达出具有功能活性的人B7.2融合蛋白，单一的人B7.2 IgV结构域足以与受体结合，共刺激T细胞活化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王一理	西安交通大学医学院免疫病理学研究室	112	527	9.0	17.0
2	耿宜萍	西安交通大学医学院免疫病理学研究室	18	77	6.0	7.0
3	来宝长	西安交通大学医学院免疫病理学研究室	20	89	7.0	8.0
4	司履生	西安交通大学医学院免疫病理学研究室	63	275	8.0	12.0
5	郑瑾	西安交通大学医学院免疫病理学研究室	30	90	5.0	8.0
6	闫晓彩	西安交通大学医学院免疫病理学研究室	9	45	4.0	6.0
7	马军	西安交通大学医学院免疫病理学研究室	30	87	6.0	8.0