小菜蛾全长cDNA文库的构建及质量分析

• 作者: 乔传令 申本昌 赵德修 金治平
• 来源期刊: 动物学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 小菜蛾 cDNA文库 SMART
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 215-219
• 页数: 5页
• 分类号: Q969.42|Q963
• 字数: 3024字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0254-5853.2003.03.011

摘要

采用SMART(switching mechanism at 5' end of RNA transcript)技术,构建了小菜蛾(Plutella xylostella)的全长cDNA文库.按TRIzol试剂盒的操作程序提取4龄期小菜蛾总RNA,以此为模板,通过PowerScript逆转录酶逆转录合成第一链cDNA;再以第一链cDNA产物为模板,用LD-PCR合成第二链cDNA.该cDNA产物经分级分离和体外包装,即获得小菜蛾cDNA原始文库,其滴度为2.6×106pfu/mL.扩增后的cDNA文库的滴度为2.4×1010pfu/mL.取适量扩增文库稀释并铺平板,挑取60个独立噬菌斑,用PCR方法测得文库的重组率大于96%,插入cDNA的长度平均为1.6kb.对60个独立噬菌体所插入的cDNA进行测序,克隆到了一个具有5'和3'非编码区的L27A核糖体蛋白基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乔传令	中国科学院动物研究所农业虫鼠害综合治理研究国家重点实验室	54	856	17.0	27.0
2	赵德修	中国科学院植物研究所	23	726	16.0	23.0
3	金治平	中国科学院植物研究所	11	314	10.0	11.0
4	申本昌	中国科学院动物研究所农业虫鼠害综合治理研究国家重点实验室	2	22	2.0	2.0