抗汉坦病毒核蛋白单链抗体的构建与表达

• 作者: 李川 李建东 梁米芳 王涛 纪燕
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 汉坦病毒 核蛋白 单链抗体
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 人与动物病毒
• 页码范围: 118-122
• 页数: 5页
• 分类号: R373.32
• 字数: 3534字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2003.02.006

摘要

汉坦病毒核蛋白在病毒各个基因组片段核糖核蛋白(RNP)复合物的形成,以及RNP复合物装配入病毒颗粒中发挥重要作用.体外研究表明,核蛋白与病毒RNA的特异性结合结构域位于第175～217个氨基酸残基,羧基端其它部分为非特异性结合结构域.为了在细胞内病毒复制的正常过程中研究核蛋白的功能,应用噬菌体表面呈现技术,分别从鼠杂交瘤细胞和人外周血淋巴细胞天然抗体库中,筛选出两株不同抗原结合位点的抗汉坦病毒核蛋白抗体L13 F3和H34Fab抗体,并在大肠杆菌中进行表达.L13 F3 Fab抗体的抗原结合位点位于核蛋白氨基端25～65个氨基酸之间,H34的抗原结合位点位于核蛋白的羧基端的一半.分别使重链可变区羧基端与轻链可变区氨基端通过9个氨基酸寡肽连接起来,构建成单链抗体,并在大肠杆菌内进行表达.通过酶联免疫吸附试验(ELSIA)、间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot检测,确定所构建单链抗体与母抗体的抗原结合特性无差别.单链抗体分子量小,易于操作并保留了全部的抗原结合活性,是在细胞内探索汉坦病毒核蛋白功能的良好工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁米芳	中国疾病预防与控制中心病毒病预防控制所	52	102	5.0	8.0
2	李川	中国疾病预防与控制中心病毒病预防控制所	38	55	4.0	6.0
3	李建东	中国疾病预防与控制中心病毒病预防控制所	24	135	5.0	11.0
4	王涛	中国疾病预防与控制中心病毒病预防控制所	3	5	1.0	2.0
5	纪燕	中国疾病预防与控制中心病毒病预防控制所	4	11	2.0	3.0