人鼻咽癌相关基因NGX6在大肠杆菌中的诱导表达及纯化

• 作者: 张秋红 李小玲 李桂源 李江 董莉 谭琛 黄宇琛
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 医学
• 关键词: NGX6基因 基因表达 融合蛋白 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 151-155
• 页数: 5页
• 分类号: Q785|R739.63
• 字数: 3293字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2003.02.011

摘要

NGX6是一个新克隆的鼻咽癌抑瘤基因候选者,为了进一步制备抗NGX6编码蛋白质的抗体和研究它的功能,本研究拟在原核表达系统中表达并纯化出NGX6蛋白.采用多聚酶链式反应(PCR)方法扩增出NGX6基因蛋白编码序列,构建该基因的融合表达质粒pGEX3X/NGX6,导入大肠杆菌中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳,Western blot鉴定.用GST融合蛋白纯化试剂盒纯化融合蛋白.结果显示构建的融合表达质粒酶切和测序鉴定阅读框架正确,导入大肠杆菌中诱导后出现一条42 kDa的新蛋白带,主要存在于细菌沉淀中,占总蛋白的26%,Western blot鉴定其为GST/NGX6融合蛋白,并进一步纯化出融合蛋白.研究表明NGX6基因编码蛋白质能够在原核细胞中表达,并能纯化出该种蛋白,为进一步深入研究该蛋白质的结构与功能打下了基础.