美洲商陆抗病毒蛋白真核表达载体的构建及在毕赤酵母中的表达

• 作者: 周广和 李莉 王锡锋 陈定虎
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 美州商陆抗病毒蛋白 毕赤酵母 发酵 表达 活性测定
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 183-186
• 页数: 4页
• 分类号: S4
• 字数: 2772字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2003.02.015

摘要

从美洲商陆(Phytolacca americana)叶片中通过异硫氰酸胍法提取出了总RNA,经RT-PCR扩增出缺失突变型抗病毒蛋白PAP基因,将该基因克隆于分泌型真核表达载体pPIC9K,然后导入毕赤酵母(Pachiapastoris)菌株GS115细胞.在甲醇的诱导下,经过酵母高密度发酵进行PAP的表达,经SDS-PAGE分析.结果表明,在培养基上清液中含有一明显的特异性蛋白条带,大小为34 kD,经Western-blotting分析,该蛋白与法国PAP抗血清有特异性反应,体外活性检测表明该蛋白对病毒的侵染性具有高度的抑制性,表明该基因在毕赤酵母GS115中得到了表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周广和	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	19	288	11.0	16.0
2	李莉	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	66	855	15.0	27.0
3	王锡锋	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	44	383	12.0	17.0
4	陈定虎	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	1	16	1.0	1.0