HCMV gp52基因的克隆与表达

• 作者: 司炳银 张雨 方毅 祝庆余
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 克隆与表达 gp52蛋白 聚合酶链反应 基因表达 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 363-366
• 页数: 4页
• 分类号: R373.3
• 字数: 3374字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2003.05.014

摘要

目的:克隆表达人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)gp52基因,制备特异性抗原,用于HCMV早期诊断.方法:从感染的HCMV细胞上清液中提取病毒的DNA, 用PCR扩增gp52蛋白IgM抗原决定簇编码区DNA片段,并将其克隆到pGEM-Teasy载体测序,然后将其克隆到含有谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX-5X-3中表达,表达产物经GST亲和层析柱纯化后,采用ELISA和免疫印迹(Western blotting)检测重组蛋白的抗原性.结果:经序列测定gp52基因片段的序列正确,并在pGEX-5X-3表达载体中得到了高效表达.表达的融合蛋白用亲和层析柱纯化后经免疫印迹和ELISA分析具有良好的抗原性,能够与HCMV IgM阳性血清呈特异性反应.结论:通过基因工程制备的重组gp52蛋白可作为抗原用于HCMV感染者的早期诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	祝庆余	军事医学科学院微生物流行病研究所	50	296	10.0	14.0
2	司炳银	军事医学科学院微生物流行病研究所	19	108	6.0	9.0
3	张雨	军事医学科学院微生物流行病研究所	8	29	3.0	5.0
4	方毅		15	49	4.0	6.0