分泌型人白细胞介素18重组质粒的构建及其真核表达

• 作者: 吴金民 张在云 潘宏铭 王林波
• 来源期刊: 实用肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素18 信号肽类 真核细胞 质粒
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 基础与临床研究
• 页码范围: 181-184
• 页数: 4页
• 分类号: R73-3
• 字数: 2658字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1692.2003.03.006

摘要

目的构建带IL-12 P40信号肽序列的分泌型IL-18质粒,使其在真核细胞中稳定表达.方法根据IL-12 P40的信号肽cDNA序列及人成熟IL-18序列设计4条特异性引物,用RT-PCR法自人树突状细胞中分别扩增IL-12 P40信号肽序列(片段A)及成熟IL-18基因(片段B),用重叠延伸PCR法拼接和扩增融合基因(片段C),连接制备pGEM-T克隆载体,亚克隆至pcDNA3.1+.转染NCI-H460人肺癌细胞株,经RT-PCR和Western blot检测IL-18的表达.结果表达质粒的酶切图谱符合预期的结果,测序结果与预期的cDNA序列完全一致,转染细胞株表达了IL-18.结论成功地构建了含IL-12 P40信号肽序列的IL-18表达质粒,并在人肺癌细胞株中得到了表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王林波	浙江大学医学院附属邵逸夫医院肿瘤中心	31	210	7.0	13.0
2	潘宏铭	浙江大学医学院附属邵逸夫医院肿瘤中心	62	881	15.0	27.0
3	吴金民	浙江大学医学院附属邵逸夫医院肿瘤中心	48	282	11.0	13.0
4	张在云	浙江大学医学院附属邵逸夫医院肿瘤中心	10	154	6.0	10.0