人血管能抑素基因N端片段的表达、纯化及其生物活性测定

• 作者: 张添元 罗进贤 胡志上 贺国安 顾取良
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管能抑素 N端片段 基因表达 蛋白质纯化 抗血管生成
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 483-487
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 英文

摘要

以中国人胎盘脐带组织为材料, 提取组织总RNA, 用RT-PCR方法合成人血管能抑素cDNA, 将该cDNA克隆进pSP72载体获得重组质粒pSP72C. 以pSP72C为模板, PCR方法合成编码血管能抑素N端1～89 aa的基因片段, 将其克隆进pET-3c载体获得重组表达质粒pET-CN,转化E. coli BL21(DE3), SDS-PAGE分析显示, 在IPTG诱导下, 人血管能抑素N 端基因片段获得了有效表达, 表达量约占菌体总蛋白质的35.3 %, 主要以包涵体形式存在. 包涵体经过洗涤、裂解、蛋白质复性以及Sephadex G-100凝胶过滤层析等步骤纯化后, 获得了纯度约92.6 % 的人血管能抑素N 端片段, CAM实验证明具有显著抑制鸡胚新生血管生成活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗进贤	中山大学基因工程教育部重点实验室	43	262	9.0	14.0
2	张添元	中山大学基因工程教育部重点实验室	28	203	7.0	13.0
3	顾取良	中山大学基因工程教育部重点实验室	3	9	2.0	3.0
4	贺国安	中山大学基因工程教育部重点实验室	6	13	2.0	3.0
5	胡志上	中山大学基因工程教育部重点实验室	2	7	1.0	2.0