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摘要:
目的构建ERβ表达载体,探讨其在肿瘤细胞株中的表达及功能.方法利用常规PCR技术扩增人全长ERβ编码序列,并将其克隆到真核表达载体pCDNA3中,得到重组质粒pCDNA3-ERβ.用Western blot和体外翻译方法检测ERβ的表达情况.将pCDNA3-ERβ分别转染SV40病毒转化的胚胎肾细胞293T、乳腺癌细胞MDA-MB-435、MDA-MB-436、SKBR3和前列腺癌细胞PC-3,用含雌激素应答元件的报告基因系统检测ERβ在这些不同细胞中的功能.结果经酶切鉴定,证实重组质粒pCDNA3-ERβ含有目的基因ERβ.Western blot 检测表明,转染pCDNA3-ERβ的细胞表达了相对分子量为63 000的ERβ蛋白.体外翻译进一步证实该表达载体翻译了ERβ蛋白.报告基因系统检测表明,ERβ在不同肿瘤细胞中的表达均激活了雌激素应答的ERE和C3报告基因的表达.结论 pCDNA3-ERβ在肿瘤细胞中既可表达,又具有功能活性,为进一步研究ERβ在肿瘤细胞中的作用奠定了基础.
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文献信息
篇名 ERβ表达载体的构建及其在肿瘤细胞中的功能研究
来源期刊 中华肿瘤杂志 学科 医学
关键词 乳腺肿瘤 受体,雌激素 基因 转染
年,卷(期) 2003,(4) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 340-343
页数 4页 分类号 R73
字数 4361字 语种 中文
DOI 10.3760/j.issn:0253-3766.2003.04.008
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 江泽飞 北京军事医学科学院第三○七医院乳癌内科 8 49 4.0 7.0
2 宋三泰 北京军事医学科学院第三○七医院乳癌内科 9 99 5.0 9.0
3 吕秋军 北京军事医学科学院放射医学研究所 2 30 2.0 2.0
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研究主题发展历程
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乳腺肿瘤
受体,雌激素
基因
转染
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中华肿瘤杂志
月刊
0253-3766
11-2152/R
大16开
北京市朝阳区潘家园南里17号
2-47
1979
chi
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