人组织激肽释放酶基因真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 孙文学 彭武建 徐卓佳 戴勇 李体远 杜珙 陈德珩
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 工学
• 关键词: 人组织激肽释放酶基因 真核表达载体 基因扩增 序列分析
• 年，卷（期）: 2003,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1286-1288
• 页数: 3页
• 分类号: T544
• 字数: 2588字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2003.12.008

摘要

目的构建并鉴定人组织激肽释放酶基(h-TKK)基因真核表达质粒.方法设计含pnI和BamHⅠ酶切位点的人组织激肽释放酶基因引物,采用PCR法从原核pBluescripe Ⅱ KSKK(+)中扩增KKcDNA片段,亚克隆至pAdtrack-CMV真核表达载体,转化感受态大肠杆菌DH10B,酶切鉴定阳性重组子,并进行序列测定.结果经PCR能扩增出738 bp 的片段,与预期片段大小相符,构建的重组体经酶切鉴定能切出插入片段,测序结果与预期序列完全一致.结论成功构建了人组织激肽释放酶基因真核表达重组体pAdtrack-CMV KK.