假单胞菌(Pseudomonas sp.cn 4902)甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因克隆及表达

• 作者: 刘广发 谭静 陈启伟
• 来源期刊: 海洋与湖沼
• 学科: 生物学
• 关键词: 假单胞菌 甘露醇-1-磷酸脱氢酶 耐盐基因 基因克隆
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 页码范围: 173-188
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 3417字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0029-814X.2004.02.012

摘要

参照几种生物的甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因(mtl D)的序列设计引物,以极端耐盐的假单胞菌(Pseudomonas sp.cn 4902)的总DNA为模板,采用PCR扩增、构建重组高效表达载体以及生物信息学研究等方法,进行基因克隆、表达及功能定性等研究.结果表明,克隆获得一长为1149bp的基因.经蛋白质保守区域研究,初步判别该基因为mtl D结构基因.将该基因与pBV220质粒构建成高效表达原核重组载体pBH.SDS-PAGE电泳表明,含pBH的转化子产生特异的、分子量约为41kD的蛋白带,表达量约占菌体可溶性蛋白6.7%.转化子的耐盐水平比对照提高了约1/5.在含0.9mol/L NaCl的液体培养基中,转化子培养24h后其生物量约是对照的10.2倍,甘露醇含量约是对照的4.1倍.可见,假单胞菌的甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因是一个重要的耐盐相关基因,该基因已在GenBank登记,代号为AY112696.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘广发	厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室	21	176	7.0	12.0
2	陈启伟	厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室	6	38	4.0	6.0
3	谭静	厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室	2	34	2.0	2.0