大肠杆菌甘露醇-1-磷酸脱氢酶基因的克隆与表达

• 作者: 庄东红 彭桂庄 欧阳永长 胡忠 谢启鑫 钟名其
• 来源期刊: 江西农业学报
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠杆菌 W3350菌株 甘露醇-1-磷酸脱氢酶 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 农艺科学
• 页码范围: 5-8,15
• 页数: 5页
• 分类号: R378.21
• 字数: 3706字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8581.2007.10.002

摘要

以大肠杆菌(Escherichia coli)W3350菌株总DNA为模板,根据已报道的几种生物的甘露醇-1-磷酸脱氢酶(mannitol-1-phosphate dehydrogenase)基因(mtlD)序列设计引物,通过PCR扩增到1条长约1.15 kb的特异片断,把该片断连接到pUCm-T载体上进行测序.序列分析结果表明,该基因编码区全长1149 bp,共编码382个氨基酸,与报道的mtlD基因修正序列完全一致.将该基因插入到原核表达载体pET28a(+),IPTG诱导表达后经SDS-PAGE分析,发现在约45 kD处明显比对照多出1条带,凝胶扫描后经Bandscan 5.0软件分析表明,该特异条带的蛋白含量占菌体可溶性总蛋白的72.9%.Western blot检测其为带组氨酸标签的融合蛋白,而质谱分析证实其为甘露醇-1-磷酸脱氢酶.转化子的耐盐能力比对照提高了约20%.该基因提交到GeneBank数据库,返回的接受号为DQ660889.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢启鑫	汕头大学生物系	21	125	7.0	10.0
3	胡忠	汕头大学生物系	53	630	15.0	23.0
4	庄东红	汕头大学生物系	63	1076	20.0	29.0
8	欧阳永长	汕头大学生物系	4	9	2.0	3.0
9	钟名其	汕头大学生物系	16	109	6.0	10.0
10	彭桂庄	汕头大学生物系	2	1	1.0	1.0