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摘要:
目的:优化重组人VEGF165(rhVEGF165)工程菌的发酵条件,分离纯化目的蛋白并检查活性.方法:考察了甲醇诱导浓度和诱导时间对目的蛋白表达量的影响;发酵液经离心、透析后,经肝素亲和柱层析、超滤制得纯品;采用CAM实验和血管内皮细胞MTT法测定生物活性,比较了与人VEGF165标准品的免疫原性.结果:最佳表达条件为:甲醇诱导浓度为1%,诱导时间为5~6 d;采用Heparin-Sepharose CL6B亲和层析后,产物纯度可达90%以上;活性测定结果显示,目的蛋白具有促血管生成作用;与人VEGF165具有相似的免疫原性.结论:经发酵纯化后获得了有活性的重组人VEGF165纯品.
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表达
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增殖
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文献信息
篇名 重组人VEGF165工程菌的发酵及表达产物的纯化与活性测定
来源期刊 中国药科大学学报 学科 生物学
关键词 血管内皮生长因子 巴氏毕赤酵母 肝素亲和层析 CAM HMVECnd增殖 免疫原性
年,卷(期) 2004,(1) 所属期刊栏目 论文
研究方向 页码范围 82-85
页数 4页 分类号 Q815
字数 2552字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-5048.2004.01.021
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 奚涛 中国药科大学生命科学与技术学院 138 927 15.0 25.0
2 沈子龙 中国药科大学生命科学与技术学院 86 688 11.0 23.0
3 成国祥 56 241 9.0 12.0
4 吴国祥 7 40 4.0 6.0
5 颜天华 7 53 3.0 7.0
6 刘煜 中国药科大学生命科学与技术学院 57 137 7.0 10.0
8 赵建阳 11 35 4.0 4.0
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免疫原性
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