克雷伯氏菌1,3-丙二醇氧化还原酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达

• 作者: 周文广 黄日波
• 来源期刊: 广西农业生物科学
• 学科: 工学
• 关键词: 克雷伯氏菌 1,3-丙二醇氧化还原酶 大肠杆菌 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术专栏
• 页码范围: 145-148
• 页数: 4页
• 分类号: Q939.97|TQ920.1
• 字数: 2671字
• 语种: 中文

摘要

以基因组DNA为模板,利用PCR技术从克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)中扩增得到含有1,3-丙二醇氧化还原酶基因(dhaT)的DNA片段,将其定向连接到克隆质粒pGEM-3zf上,得到重组质粒pGEM-dhaT.将此重组质粒转化到受体菌Escherichia coli DH5α中,通过蓝白斑鉴定挑选出阳性菌株.DNA序列分析表明其基因全长为1 185 bp.将该片段插入表达载体pSE380,构建成重组子pSE-dhaT,并在E.coli JM109中获得表达,经SDS-PAGE检测,表达产物分子质量与天然纯1,3-丙二醇氧化还原酶(DHAT)相同,约为43 ku.