克雷伯肺炎杆菌1,3-丙二醇氧化还原酶基因克隆及表达条件研究

• 作者: 曲荟锦 王凤寰 田平芳 谭天伟
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 医学
• 关键词: 克雷伯肺炎杆菌 1,3-丙二醇氧化还原酶基因 克隆 蛋白表达 表达部位确定
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 25-29
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3718字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2007.01.005

摘要

1,3-丙二醇氧化还原酶是甘油歧化为1,3-丙二醇的一种关键酶.本研究从克雷伯肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)基因组中,用PCR方法克隆了其编码基因dhaT.TA克隆测序正确后,构建胞内表达载体pET-28a-dhaT和分泌表达载体pET-22b-dhaT,然后转化E.coli BL21(DE3)进行原核表达.表达部位确定、SDS-PAGE和酶活分析表明,该酶得到了高水平表达.其中使用pET-22b表达的目的蛋白大都是不溶的包涵体;而使用pET-28a表达的目的蛋白胞内可溶,占胞内可溶总蛋白的45 %,占菌体总蛋白的25 %.常规(30 ℃)诱导表达即呈现1,3-丙二醇氧化还原酶活性,但低温(20 ℃)14 h诱导显示3.7倍的酶活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭天伟	北京化工大学生命科学与技术学院	314	5281	37.0	56.0
2	田平芳	北京化工大学生命科学与技术学院	66	262	9.0	13.0
3	王凤寰	北京化工大学生命科学与技术学院	5	32	3.0	5.0
4	曲荟锦	北京化工大学生命科学与技术学院	2	22	2.0	2.0