腺病毒相关病毒增强型mIL-10质粒的构建及表达

• 作者: 何志锋 倪一鸣 冯强 邹煜
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: IL-10 腺病毒相关病毒 心肌细胞 RT-PCR 脂质体
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 279-282
• 页数: 4页
• 分类号: R392.9
• 字数: 2723字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2004.04.005

摘要

构建腺病毒相关病毒增强型mIL-10质粒,并在心肌细胞内进行表达.利用分子克隆技术,将腺病毒相关病毒(AAV)中的末端重复序列(ITR)插在pORF5-mIL-10质粒启动子的上游,构建pORF-AAV-mIL-10质粒.在阳离子脂质体Lipofectin介导下,pORF5-mIL-10和pORF-AAV-mIL-10分别转染次代培养心肌细胞,TRIzol一步法提取总RNA,RT-PCR检测mIL-10的mRNA;ELISA检测培养细胞上清中mIL-10的表达.结果是用双酶切证实成功构建质粒,分别在转染24 h、48 h、72 h、96h、120 h后,用RT-PCR在心肌细胞中检测到相应的目的条带,ELISA检测各组mIL-10的表达量.证实在阳离子脂质体Lipo-fectin介导下,pORF-AAV-mlL-10能在一定时间内稳定的增加mIL-10在心肌细胞内的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹煜	浙江大学医学院附属第一医院心胸外科	31	154	7.0	10.0
2	冯强	浙江大学医学院附属第一医院心胸外科	23	63	4.0	7.0
3	倪一鸣	浙江大学医学院附属第一医院心胸外科	56	194	7.0	12.0
4	何志锋	浙江大学医学院附属第一医院心胸外科	1	0	0.0	0.0