一种有效的体外连接法构建heNOS重组腺病毒

• 作者: 冉丕鑫 李冰 赵祝香
• 来源期刊: 广州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 体外连接 腺病毒 载体
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 66-68
• 页数: 3页
• 分类号: R34
• 字数: 2178字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-1836.2004.02.022

摘要

目的:探讨一种新的有效的体外连接方法构建重组腺病毒转移载体.方法:将目的基因heNOS(人内皮型一氧化合酶)亚克隆到穿梭质粒pShuttle启动子CMV的下游,再通过I-Ceu Ⅰ和PI-Sce Ⅰ两个稀有酶切位点,将目的基因heNOS与腺病毒质粒DNA(pAdeno-X)进行体外连接,获得含目的基因heNOS重组腺病毒质粒DNA,后者经限制性内切酶Pac Ⅰ切割后,两端露出反向末端重复序列(ITR),利用脂质体转染293细胞,获得含目的基因重组腺病毒上清.PCR双引物检测含有目的基因heNOS片段.结果:PCR双引物检测含有目的基因heNOS片段,表明利用体外连接法成功构建了含目的基因heNOS重组腺病毒转移载体.结论:体外连接法是一种有效的复制缺陷型重组腺病毒构建方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李冰	广州医学院实验医学研究中心	139	847	15.0	20.0
2	冉丕鑫	广州医学院呼吸疾病研究所	79	1420	17.0	36.0
3	赵祝香		16	103	5.0	10.0