人肝再生磷酸酯酶2(PRL-2)的原核表达及其鸡卵黄抗体的制备

• 作者: 丁波 文剑明 曹云新 王文 郭爱林 黄郁强
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝再生磷酸酯酶2 融合蛋白 亲和层析 鸡卵黄抗体
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 578-581
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3842字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2004.05.018

摘要

目的:原核表达人肝再生磷酸酯酶2(PRL-2)与谷胱甘肽S转移酶(GST)和6个串联组氨酸(6×His)的融合蛋白,并制备GST-PRL-2特异性鸡卵黄抗体.方法:将人PRL-2 cDNA的全长蛋白编码序列,克隆入两种原核表达载体pGEX-4T-2和pET21a中,在大肠杆菌BL21中诱导表达融合蛋白.用Glutathione Sepharose 4B和Ni-NTA agarose亲和柱分别纯化目的蛋白.以纯化的GST-PRL-2融合蛋白免疫产蛋母鸡制备多克隆抗体,应用6×His-PRL-2对抗体进行亲和层析纯化,纯化产物用Western blot进行分析.结果:得到高表达量的融合蛋白,经亲和层析柱纯化后获得较高纯度的GST-PRL-2和6×His PRL-2融合蛋白.以GST-PRL-2融合蛋白免疫鸡得到抗PRL-2的多克隆抗体,Western blot证实,经6×His PRL-2亲和层析纯化的抗体,能够识别6×His-PRL-2和GST-PRL-2融合蛋白,但不同GST蛋白起反应,表明具有较高的特异性.结论:利用原核表达的人PRL-2融合蛋白制备的抗PRL-2多克隆抗体具有较好的特异性,为研究PRL-2蛋白在细胞信号转导过程中的作用提供了重要的技术和材料保障.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	文剑明	中山大学中山医学院病理学教研室	48	252	9.0	12.0
2	曹云新	第四军医大学免疫学教研室	108	741	14.0	21.0
3	郭爱林	中山大学中山医学院病理学教研室	7	60	5.0	7.0
4	王文	中山大学生命科学院	1	3	1.0	1.0
5	丁波	中山大学生命科学院	2	9	2.0	2.0
6	黄郁强	中山大学生命科学院	1	3	1.0	1.0