酵母双杂交技术筛选HCV F蛋白结合蛋白基因

• 作者: 刘敏 张树林 成军 杨倩 杨瑗 王琳 白桂芹 黄燕萍
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 生物学
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 1701-1704
• 页数: 4页
• 分类号: Q5
• 字数: 4908字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2004.07.045

摘要

目的:丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白是一个新的HCV基因产物,其生物学特性目前尚不明确,我们应用酵母双杂交系统Ⅲ技术进行筛选F蛋白结合蛋白基因.方法:构建F蛋白诱饵质粒,转化酵母AHl09后与含肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合,在涂有X-α-gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长.挑选蓝色克隆,提取此酵母克隆的质粒,转化大肠杆菌提取质粒DNA后测序,进行生物信息学分析.结果:筛选出36个与F蛋白特异性相互作用的克隆,其中11个为人类酶原颗粒蛋白,5个锌指蛋白,6个SL15蛋白,2个过氧化物酶体离子蛋白酶,1个补体调节蛋白因子,2未知功能基因.结论:克隆到的基因对以后研究F蛋白的功能有一定提示作用.