人巨细胞病毒gB基因真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 何薇薇 张中洋 李秀玲 许丽锋
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 真核表达载体 gB糖蛋白
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 284-286
• 页数: 3页
• 分类号: R394
• 字数: 1743字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2004.05.009

摘要

目的克隆人巨细胞病毒(HCMV)gB基因并构建真核表达载体.方法根据Genebank中HCMV核苷酸序列设计引物,并在引物的5′端分别加入BamH Ⅰ、Xho Ⅰ限制性内切酶位点,特异性扩增gB编码基因片段.TA克隆后经双酶切、PCR、测序等鉴定重组质粒,再经双酶切、连接构建含HCMV gB编码基因的真核表达载体,转染COS7细胞,通过间接免疫荧光法(IFA)检测该重组真核表达载体在COS7细胞中的表达.结果重组质粒经BamH Ⅰ、Xho Ⅰ双酶切成大小为5.0kb与2.7kb的片段,表明表达载体pcDNA3.1中插入了HCMV gB基因片段,测序结果表明读码框正确.重组表达载体pcDNA3.1/gB转染COS7细胞后,经IFA检测胞浆中可见黄绿色荧光.结论成功构建了pcDNA3.1/gB真核表达载体,并可在COS7细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许丽锋		16	43	3.0	5.0
2	李秀玲		25	73	5.0	6.0
3	何薇薇		8	27	4.0	4.0
4	张中洋		14	38	4.0	4.0