人巨细胞病毒IE1真核表达载体的构建与表达

• 作者: 万艳平 余敏君 曹清香 蔡恒玲 陈琳
• 来源期刊: 南华大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒(HCMV) IE1 表达
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5-7,11
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 2140字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2008.01.002

摘要

目的 构建人巨细胞病毒(HCMV)IE1真核表达载体,观察其在真核细胞内的表达,为HCMV IE1核酸疫苗的相关研究奠定基础.方法 将质粒pNEB193-IE1用SalⅠ、BamHⅠ双酶切与载体pEGFP-C1连接构建重组载体pEGFP-C1-IE1;双酶切鉴定后,取重组载体pEGFP-C1-IE1用 EcoRⅠ、HindⅢ双酶切与载体pcDNA3.1(-)连接构建重组质粒pcDNA3.1(-)-IE1,双酶切和测序鉴定;将重组质粒pcDNA3.1(-) -IE1转染HeLa细胞,RT-PCR检测IE1 mRNA的表达.结果 重组载体pEGFP-C1-IE1和 pcDNA3.1(-)-IE1双酶切后均可切出约1 476 bp目的 片段;重组载体pcDNA3.1(-)-IE1测序结果登录GenBank,作BLAST分析,含有1 476 bp目的 基因片段,无碱基错配和移码突变,与读码框完全一致;转染重组载体pcDNA3.1(-)-IE1的细胞中可扩增出约1 476 bp的目的 条带.结论 成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-IE1,且其能在真核细胞内表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余敏君	南华大学病原生物研究所	104	491	11.0	17.0
2	万艳平	南华大学病原生物研究所	157	780	13.0	20.0
3	陈琳	南华大学病原生物研究所	45	147	7.0	9.0
4	蔡恒玲	南华大学病原生物研究所	40	109	6.0	8.0
5	曹清香	南华大学病原生物研究所	4	11	2.0	3.0