D-氨基酸氧化酶在不同毕赤酵母宿主菌中的表达比较

• 作者: 余志良 冯美卿 史训龙 周珮 袁中一 黄海
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: D-氨基酸氧化酶 甲醇酵母 不同宿主菌 表达比较 DL-苯丙氨酸 拆分
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 酶工程
• 页码范围: 572-577
• 页数: 6页
• 分类号: Q814
• 字数: 5523字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.04.019

摘要

D-氨基酸氧化酶(DAAO)在转化头孢菌素C生产7-ACA和转化DL-氨基酸制备α-酮酸和L-氨基酸上起着重要的作用.采用DNA操作技术,将来源于三角酵母的DAAO基因连接至表达载体pPIC3.5K上,再将表达质粒pPIC3.5K-DAAO分别整合P. pastoris的宿主细胞KM71和GS115,经筛选获得阳性重组菌PDK13(MutS)和PD27(Mut+).重点对两种突变菌的表达条件进行了比较.结果显示:PDK13(MutS)株比PD27(Mut+)株消耗甲醇慢、诱导时间长,但对通气量要求低、表达水平高,摇瓶活力分别达到2700和2500 IU/L,14L发酵罐内活力分别达到10140和8463 IU/L.初步探索了DAAO对DL-苯丙氨酸的拆分,结果显示基因工程菌表达的DAAO具有良好的转化DL-苯丙氨酸制备苯丙酮酸和L-苯丙氨酸的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄海	复旦大学药学院	22	117	7.0	9.0
2	冯美卿	复旦大学药学院	29	117	6.0	9.0
4	周珮	复旦大学药学院	32	228	9.0	14.0
5	袁中一	中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所	38	695	13.0	26.0
8	史训龙	复旦大学药学院	13	39	4.0	5.0
9	余志良	中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所	3	91	3.0	3.0