乙醇酸氧化酶基因在巴斯德毕赤氏酵母中的表达

• 作者: 何冰芳 刘志斌 吴旭亚 李霜 欧阳平凯
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 乙醇酸氧化酶 克隆 表达载体
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 46-49,58
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 字数: 3379字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2003.02.011

摘要

将菠菜乙醇酸氧化酶基因片段克隆至表达载体pPIC3.5k.提取重组质粒,进行限制性酶切鉴定.重组质粒用Sal I酶切线性化,电导入法转化毕赤酵母(Pichia pastoris),在缺乏组氨酸的RDB平板筛选重组子,提取酵母的染色体基因组进行PCR扩增鉴定整合情况,用甲醇诱导表达.结果表明,Sds-PAGE电泳显示表达蛋白的分子量约为39.8 kD,与文献报道的乙醇酸氧化酶分子量接近.酶的活力达到了40.8 IU/g湿菌体,比不含有目的片断的对照菌酶活提高了17倍,确认了导入的乙醇酸氧化酶基因片段在酵母中高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	欧阳平凯	南京工业大学制药与生命科学学院	194	2558	26.0	40.0
2	李霜	南京工业大学制药与生命科学学院	87	705	13.0	22.0
3	刘志斌	南京工业大学制药与生命科学学院	5	84	4.0	5.0
4	何冰芳	南京工业大学制药与生命科学学院	91	785	14.0	24.0
5	吴旭亚	南京工业大学制药与生命科学学院	1	13	1.0	1.0