SARS-CoV基因重组质粒的构建与表达

• 作者: 周华 曾政 王希良 王英 田光 石辛甫 罗德炎 赵光宇
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SARS冠状病毒 M、N、S、E蛋白 重组质粒 表达
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: SARS
• 页码范围: 397-399
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2821字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.05.023

摘要

目的针对SARS冠状病毒(SARS-CoV) M、N、S和E蛋白,构建4种重组真核表达质粒pVAX1/M、pVAX1/N、pVAX1/S和pVAX1/E,为研制SARS DNA疫苗奠定基础.方法根据GenBank中SARS病毒基因序列分别设计M、N、S和E引物,用RT-PCR方法从感染SARS病毒的Vero-E6细胞中扩增得到M、N、S和E片段,构建重组质粒pVAX1/M、pVAX1/N、pVAX1/S和pVAX1/E.并以重组质粒转染COS-7细胞,用免疫细胞化学和Western blot方法鉴定重组质粒体外的表达.结果经酶切鉴定及DNA序列测定证实重组质粒构建正确,细胞转染实验表明,构建的4种重组质粒均能在COS-7细胞内表达.结论成功构建4种SARS-CoV 4种蛋白抗原真核表达质粒,并能在真核细胞内获得表达.